大鼠组织蛋白酶K(cath-K)ELISA试剂盒说明书

级别：	PH标准试剂	用途：	实验室
含量：	电询	应用：	科学研究
型号：	DMD0593	规格：	96T/48T
商标：	DM	包装：	盒装
运输过程：	低温运输	产量：	10000

大鼠组织蛋白酶K(cath-K)ELISA试剂盒说明书笃玛生物大鼠组织蛋白酶K(cath-K)ELISA试剂盒说明书品牌优势：1.高效，灵敏，特异的抗体2.稳定的重复性和可靠性3.吸附性能好，空白值低，孔底透明度高和固相载体4.适用血清，血浆，组织匀浆液，细胞培养上清液，尿液等多种标本类型ELISA的样本实验准备在收集样本前都必须有一个完整的计划，必须清楚要检测的成份是否足够稳定。对收集后当天就进行检测的样本，及时储存在4℃备用。对于隔天再检测的样本，及时分装后冻存在-20℃备用，有条件的，最好-70℃冻存备用。标本应避免反复冻融。大鼠组织蛋白酶K(cath-K)ELISA试剂盒说明书液体类标本:包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。1.血清：室温血液自然凝固10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。2.血浆：应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。3.尿液：用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。4.细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。5.培养细胞检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。6.组织标本切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），或组织蛋白萃取试剂,用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。大鼠组织蛋白酶K(cath-K)ELISA试剂盒说明书笃玛代测服务：技术服务内容：1、双抗体夹心法检测抗原2、间接法检测抗体3、为客户提供各种ELISA技术进行样本检测。寄标本时需注明以下情况：1、标本编号；2、所测项目；3、是否做复孔；4、联系方式；5、实验后标本是否寄回。代测，有什么具体要求？样本要处理过的，寄来的样本附检验要求（一定要附检验要求）样本寄来要记得保存好，一定要放置冷冻冰袋什么样的检验要求？要出示什么吗？怎样算是处理过？还是就只是离心保存？答：离心保存，检验要求，就是标本标号，和特殊要求问：测好多指标血清不分开可以么？答：要分开，分好后，分别标上序列号，便于实验好区分。操作步骤实验开始前，请提前配置好所有试剂，试剂或样品稀释时，均需混匀，混匀时尽量避免起泡。每次检测都应该做标准曲线。大鼠组织蛋白酶K(cath-K)ELISA试剂盒说明书如样品浓度过高时，用样品稀释液进行稀释，以使样品符合试剂盒的检测范围。1.加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl，余孔分别加标准品或待测样品100μl，注意不要有气泡，加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，酶标板加上盖或覆膜，37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。2.弃去液体，甩干，不用洗涤。每孔加生物素标记抗体工作液100μl（取1μl生物素标记抗体加99μl生物素标记抗体稀释液的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制），37℃,60分钟。3.温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分钟，350μl/每孔，甩干。4.每孔加辣根过氧化物酶标记亲和素工作液（同生物素标记抗体工作液）100μl，37℃，60分钟。5.温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分钟，350μl/每孔，甩干。6.依序每孔加底物溶液90μl，37℃避光显色（30分钟内，此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度蓝色，后3-4孔梯度不明显，即可终止）。7.依序每孔加终止溶液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性，底物反应时间到后应尽快加入终止液。8.用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度（OD值）。在加终止液后15分钟以内进行检测。